Um método versátil e com rápida sensibilidade para a determinação individual e simultânea das drogas anticancerígenas emodina (Em) e irinotecano (Irino) em fluidos biológicos baseados na voltametria de onda quadrada (SWV) utilizando um eletrodo de grafite de lápis renovável (PGE), foi investigado. A acumulação adsortiva controlada de Em e Irino na superfície PGE foi explorada para a determinação de traços de drogas anticancerígenas em fluidos biológicos. Sob as condições experimentais otimizadas como o pH do eletrólito suporte, potencial e tempo de acumulação e parâmetros eletroquímicos, curvas de calibração para análise de traços de Em e Irino individualmente e simultaneamente, mostraram uma excelente resposta linear. Os limites de detecção 5,17 × 10-10 e 1,68 × 10-9 mol L-1 de Em e Irino foram obtidos usando SWV em um PGE, respectivamente. Os resultados obtidos mostraram boa estabilidade, reprodutibilidade, repetibilidade e alta recuperação para a determinação de traços das duas drogas em fluidos biológicos. A análise estatística e os dados da curva de calibração para determinação de traços de Em e Irino individualmente, bem como, simultaneamente, são relatados. A rapid sensitive and versatile method for the individual and simultaneous determination of the anticancer drugs emodin (Em) and irinotecan (Irino) in biological fluids based on the square wave voltammetry (SWV) using a renewable pencil graphite electrode (PGE) was investigated. Controlled adsorptive accumulation of both Em and Irino on the PGE surface was exploited for trace determination of the anticancer drugs in biological fluids. Under the optimized experimental conditions such as supporting electrolyte pH, accumulation potential and time and electrochemical parameters, calibration curves for trace assay of Em and Irino individually and simultaneously showed an excellent linear response. Limits of detection of 5.17 × 10-10 and 1.68 × 10-9 mol L-1 Em and Irino in bulk form were achieved using SWV at a PGE, respectively. The obtained results showed good stability, reproducibility, repeatability and high recovery to assay of two drugs in biological fluids. The statistical analysis and the calibration curve data for trace determination of Em and Irino individually as well as simultaneously are reported.